생화학 제9판 제 5장

목차

1. 세포에서 순수한 단백질 추출하기
2. 칼럼 크로마토그래피
3. 전기영동
4. 단백질의 1차 구조 결정하기
5. 단백질 검출 기술
6. 단백질체학

본문내용

5-1 세포에서 순수한 단백질 추출하기
균질화
세포에서 단백질을 어떻게 얻어내는가?
세포를 파괴하여 여는 과정 : 믹서로 가는 것, 포터-엘베헴 균질기 사용, 초음파분해, 냉해동 반복, 세제 사용

원심분리
· 분별 원심분리 : 매번 중력을 증가시켜 주면서 여러 번 원심분리 하는 과정
· 600×g→파괴되지 않은 세포와 핵(침전물)→15,000×g→미토콘드리아(침전물)→100,000×g→라이보솜, 마이크로솜(막의 파편/소포체, 골지체, 원형질막 조각)

가염석출
· 염 용액 내에서의 용해도 차이에 근거하여 단백질을 정제하는 기술
· 황산암모늄
· 유기용매 침전법 : 냉아세톤이나 알코올

5-2 칼럼 크로마토그래피
· 정지상을 이루고 있는 물질 위로 이동상을 흘려보내면, 분리하고자 하는 시료는 이 이동상을 따라 같이 이동
· 시료의 구성성분들이 정지상과 상호작용을 하면서 이동
· 성분들의 이동서의 차이가 분리의 기본 원리

참고 자료

생화학 제9판 / 곽한식, 김재원, 김하근, 태건식 / (주)라이프사이언스 / 2019