[미생물학] 기초 유전학 - 기말고사

소개글

2001학년도 제 1학기 미생물학 기말고사

목차

1. 용어설명
2. DNA sepuencing
3. DNA의 특징
4. DNA의 합성
5. Proofreading
6. DNA 복제시 RNA primer 제거
7. RNA processing
8. 단백질 합성과정
9. RNA 합성
10. Lac operon
11. Trp operon

본문내용

2. DNA sequencing method Maxam - Gilbert방법과 Sanger방법을 비교 설명하시오.

분자생물학 실험중 DNA의 염기서열을 밝히는 것은 매우 중요한 일이다. 염기서열을 결정하는 방법에는 두가지가 있는데 Maxam과 Gilbert가 개발한 화학반응을 이용한 방법(1977, 1980)은 화학제를 이용하여 DNA 내의 특정 염기부위를 절단하여 그 조각을 분석하는 방법이고, Sanger가 개발한 효소반응을 이용한 방법(1982)은 dideoxyribonucleotides를 이용하여 분석하는 방법이다.

Sanger의 방법은 dideoxy chain termination 방법, 효소를 이용한 방법 등으로 불리우며, DNA polymerase I(혹은 T7 DNA polymerase, Taq DNA polymerase)과 동위원소로 표지된 nucleotide ([a-35S]dATP, [a-32P]dATP)와 나머지 세종류의 표식이 안된 nucleotide가 들어있는 반응액을 4가지 2',3'-dideoxyribonucleotide가 각각 한 종류씩 들어있는 tube에 옮겨 반응시킨다. 이때, dideoxy analog에는 3'-OH가 없기 때문에 더이상 새로운 DNA 합성이 일어나지 못하므로 여러 크기의 DNA fragment 를 얻게 되고, 이를 denaturing polyacrylamide gel에 전기영동하면 DNA의 염기배열 순서를 결정할 수 있다. Template DNA로는 double strand plsmid, M13 single strand DNA, double strand or single strand PCR product를 이용할 수 있다.

참고 자료

Molecular biology-라이프 사이언스
Brock Biology of Microorganisms-9판
Principles of Biochemistry-Lehninger,Nelson,Cox
(생화학-채범석역-외국서적)